Kamis, 13 Oktober 2011

media penanaman bakteri


MEDIA
1.      Pengertian Media
Media merupakan suatu campuran yang terdiri atas nutrisi yang dipergunakan untuk menumbuhkan, mengembangbiakkan, memperbanyak, menghambat, mengetahui morfologi, identifikasi, karakteristik dan sensitivitas suatu obat antibiotik serta lain-lain pada mikroorganisme
Media dapat juga dipergunakan dalam mendiagnosa suatu penyakit melalui pemeriksaan laboratorium.

2.      Macam-macam media
2.1.            Media Transport
Media ini digunakan untuk menunda pertumbuhan mikroorganisme dalam batas tertentu, yang tidak mematikan dan mengembangbiakkan. Contoh: media amies.
Media Amies
Komposisi        :
Ø  Charcoal                                                          10 gram
Ø  NaCl                                                                    3gram
Ø  Sodium Hydrogen Phosphate                          1,15gram
Ø  Potassium Dihydrogen Phosphate                  0,2gram
Ø  Potassium Chloride                                         0,2gram
Ø  Sodium Thioglycollate                                     1,0gram
Ø  Calcium Chloride                                            0,1gram
Ø  Magnesium Chloride                                      0,1gram
Ø  Agar no.1                                                         4,0gram
Ø  Aquadest                                                         1.000ml
pH        : 7,2
                        Media ini disteril dalam autoclave 121˚C 15 menit, media stok disimpan pada suhu 37˚C, media jadi disimpan pada suhu 37˚C.  Bila yang mengandung Charcoal bias digunakan untuk pemeliharaan Neisseria gonorrhoeae.

2.2.            Media Pemupuk
Suatu media yang dipergunakan untuk memupuk atau memperbanyak mikroorganisme. Contoh : Media Gall Broth/ Gall Culture atau perbenihan empedu

Gall Broth/Gall Culture/Perbenihan Empedu
Komposii          :
Ø  Empedu murni                                                1000ml
Ø  Bacto pepton                                       10gram
Ø  NaCl                                                     5gram
Media ini disteril dalam autoclave 121˚C selama 15 menit. Stock media gall disimpan di suhu 37˚C, media jadi disimpan di suhu 37˚C. Media ini bersifat selektif hanya untuk memperbanyak golongan kuman Salmonella.

2.3.            Media Differensial
Suatu media yang digunakan untuk memindahkan pertumbuhan moikroorganisme. Contoh : Media EMB Agar dan CLED Agar
2.3.1.       Media EMB Agar
Komposisi        :
Ø  Bacto pepton                           10gram
Ø  Lactose                                                5gram
Ø  Sakarose                                  5gram
Ø  Dipotassium phosphate           2gram
Ø  Agar                                         13,5gram
Ø  Eosin                                        0,4gram
Ø  Methylen Blue                         0,065gram
Ø  Aquadest                                  1000ml
pH        : 7,2
Media ini disteril dalam autoclave suhu 121˚C selama 15 menit. Stock media disimpan pada suhu 25˚C, media jadi dalam petridish disimpan pada suhu 4-8˚C dalam lemari es. Media ini membedakan antara Escherchia coli yang koloninya berwarna Methallic sheen. Sedangkan Enterobacter aerogenes berwarna pink.



2.3.2.       Media CLED Agar
Komposisi        :
Ø  Bacto pepton                           4gram
Ø  Beef extrack                            3gram
Ø  Tryptone                                  4gram
Ø  Lactose                                                10gram
Ø  Cystine                                     0,128gram
Ø  BTB                                          0,02gram
Ø  TB                                            0,1grm
Ø  Agar no.1                                 15gram
Ø  Aquadest                                  1000ml
Media ini disteril dalam suhu autoclave 121˚C selama 15 menit. Stock media disimpan pada suhu 25˚C, media jadi dalam petridish disimpan pada suhu 4-8˚C dalam lemari es. Koloni dalam media ini berwarna-warni sehingga memudahkan dalam mengidentifikasi. Seperti, koloni E.coli berwarna pink, P.mirabilis berwarna biru kehijauan, K.aurogenes berwarna hijau kelabu koloni transparans kecil-kecil, Staphylococcus aureus berwarna kuning, staphylocoocus faecalis berwarna kuning oranye, dan staphylococcus pyogenes berwarna hijau kelabu koloni kecil-kecil gelap.

2.4.            Media Selective
Suatu media yang dipergunakan untuk menumbuhkan, mengembang-biakkan mikroorganisme tertentu, sedangkan mikroorganisme lainnya dihambat agar tidak tumbuh. Contoh : Media TCBS Agar, Media Sabroud Dextrose Agar
2.4.1.       Media TCBS Agar
Komposisi        :
Ø  Yeast Extrack Powder              5gram
Ø  Bacto peptone                         10gram
Ø  Sodium thiosulphate                10gram
Ø  Sodium citrate                         10gram
Ø  Ox Bile                                     8gram
Ø  Sakarose                                  20gram
Ø  NaCl                                         10gram
Ø  Ferric citrate                           1gram
Ø  BTB                                          0,04gram
Ø  TB                                            0,04gram
Ø  Agar no.1                                 14gram
Ø  Aquadest                                  1000ml
pH        : 8,6
Media ini tidak disteril di autoclave, tapi dengan cara dididihkan sampai mendidih larut sempurna (100˚C). Media stock disimpan dalam suhu 37˚C, media jadi dalam petridish disimpan pada suhu kamar, tapi lebih baik pada suhu 4-8˚C dalam lemari es. Umur media ini 5 hari. Media ini khusus untuk kuman V.cholerae koloninya berwarna kuning trengguli, dan V.parahaemolyticus berwarna kuning trengguli dengan titik pusat hijau.

2.4.2.       Media Sabroud Dextrose Agar
Komposisi        :
Ø  Bacto pepton                           10gram
Ø  Dextrose                                  40gram
Ø  Agar no.1                                 15gram
Ø  Aquadest                                  1000ml
Ø  Antibiotic                                 10ml
pH        : 5,6
Media ini disteril dalam autoclave 121˚C selama 15 menit. Media stock disimpan pada suhu 37˚C, media jadi disimpan pada suhu 4-8˚C dalam lemari es. Media ini untuk isolasi jamur yang pathogen.
2.5.            Media Biokimia Reaksi
Suatu media yang dipergnakan untuk mengetahui biokimia reaksi dari masing-masing mikroorganisme berdasarkan sifat-sift biokimia reaksi yang ditimbulkan. Contoh : Media KIA, media gula-gula, media simmon citrate

2.5.1.       Media KIA
Komposisi        :
Ø  Beef extrack                            3gram
Ø  Yeast extrack                           3gram
Ø  Peptone                                   20gram
Ø  NaCl                                         5gram
Ø  Lactose                                                10gram
Ø  Dextrose                                  1gram
Ø  Ferric citrate                           0,3gram
Ø  Sodium thiosulphate                0,3gram
Ø  Phenol red                               0,05gram
Ø  Agar                                         12gram
Ø  Aquadest                                  1000ml
Media ini disteril di autoclave suhu 121˚C selama 15 menit. Stock media disimpan pada suhu 37˚C, media jadi disimpan pada suhu  37˚C. Media ini untuk ,mengetahui fermentasi double Karbohidrat, dan terbentuknya H2S dan gas.
Kuman
Gas
Lereng
H2S
Aerobacter aerogenes
AG
A
-
Proteus vulgaris
A or AG
NC
+
Salmonella thyposa
A
Ncor Alkali
+
Salmonella CHoleraesius
AG
Ncor or alkali
-
Escherichia coli
AG
A
-
Keterangan        : AG     : Acid (kuning)dan gas
A        : Acid kuning
NC      : tidak ada penmbahan
Alk      : Alkalis (merah)
+         : H2S (hitam)
-         : Tidak ada H2S (tidak hitam)

2.5.2.       Media Gula-gula
Terdiri dari      :
a.      Air pepton, sebagai pelarut
Komposisi        :
Ø  Bacto pepton               10gram
Ø  NaCl                             5gram
Ø  Aquadest                      1000ml
pH        : 7,4
Media ini disteril di autoclave, media ini disimpan pada suhu 37˚C, digunakan sebagai pelarut gula-gula dan uji test reaksi indol dengan ditambahkan reagent kovac.
b.      Gula-gulanya
Komposisi        :
Ø  Air pepton                                            100ml
Ø  Gula-gula (glukosa, galaktosa, dll)      1gram
Ø  BTB 4%                                                            1ml
Media ini disteril di autoclave, disimpan pada suhu 37˚C, media ini digunakan untuk mengetahui fermentasi karbohidrat.

2.5.3.       Media Simmon citrate
Komposisi        :
Ø  Magnesium sulfate                             : 0,2gram
Ø  Ammonium dehydrogen phosphate    : 1gram
Ø  Dipotassium phosphate                       : 1gram
Ø  Sodium citrate                                     : 2gram
Ø  Bakto agar                                           : 15gram
Ø  BTB                                                      : 0,08gram
Ø  Aquadest                                              : 1000ml
Media ini disteril di autoclave. Stock media disimpan pada suhu 30˚C, media jadi disimpan pada suhu 30˚C. media ini diganakan untuk identifikasi adanya carbon pada isolasi bakteri golongan Enterobacteriaceae.
·         Enterobacter aerogenes               positif berwarna biru
·         Escherichia coli                             negative berwarna hijau
·         Salmonella thypi                            positif berwarna hijau
·         Shigella dysentriae                                    negative berwarna hijau










BAB III
PENUTUP
3.1. Kesimpulan
Dari berbagai macam media, media dibagi menjadi beberapa kelompok. Ada media transport, media pemupuk, media differensial, media selective, dan media Biokimia reaksi. Semua media-media ini perlu ditangani secara khusus dalam pembuatannya agar didapat media yang baik dan siap pakai.
3.2. Saran
·         Semoga sedikit pengenalan tentang media ini bermanfaat bagi para tehnisi laboratorium
·         Semoga untuk para analis bisa menggali lebih banyak pengetahuan media yang tidak semudah apa yang dilihat

Tidak ada komentar:

Poskan Komentar